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促黃體生成激素放免試劑盒，LH放免實驗檢測

人促黃體生成激素放射免疫分析藥盒說明書

【藥品名稱】

通用名：碘[¹²⁵I]人促黃體生成激素放射免疫分析藥盒

英文名：Iodine [¹²⁵I] Human Luteiniziing Hormone Radioimmunoassay Kit

漢語拼音：Dian[¹²⁵I] Rencuhuangtishengchengjisu Fangshemianyifenxi Yaohe

【成分】

【性狀】液體組分(免疫分離劑除外)應(yīng)澄清，無沉淀或絮狀物；凍干組分應(yīng)呈疏松狀，復(fù)溶后應(yīng)無沉淀或絮狀物。

【放射性核素半衰期】本品所用核素為碘[¹²⁵I]，其物理半衰期(T1/2)為60天。

【意義】

LH由垂體前葉嗜堿細(xì)胞分泌的一種糖蛋白激素，其蛋白部分由204個氨基酸構(gòu)成α和β兩個亞基，α亞基與FSH、TSH和HCG相同，只有β亞基具有特異的結(jié)構(gòu)，兩者通過非共價鍵連接，分子量約為30KD。LH和FSH都呈脈沖式分泌，故有較明顯的日內(nèi)和日間變異。女性月經(jīng)中期的LH高峰促成排卵；男性LH主要刺激gao丸間質(zhì)細(xì)胞分泌gao丸酮，又協(xié)同F(xiàn)SH促進(jìn)精zi成熟。LH的測定在預(yù)測排卵，診斷不孕癥，研究和判斷下丘腦-垂體-性腺軸功能及有關(guān)內(nèi)分泌疾病的治療監(jiān)測等方面有重要意義。對作用于下丘腦-垂體-性腺軸的女性避yun藥的藥理研究也有很大價值。

本藥盒采用放射免疫分析方法，測定人血清中的LH含量。

促黃體生成激素放免試劑盒，LH放免實驗檢測

【測定原理】

應(yīng)用競爭機(jī)制原理，標(biāo)準(zhǔn)或樣品中的LH和加入的¹²⁵I-LH共同與一定量的特異性抗體產(chǎn)生競爭性免疫反應(yīng)。¹²⁵I-LH與抗體的結(jié)合量與標(biāo)準(zhǔn)或樣品中LH的含量呈一定的函數(shù)關(guān)系。用免疫分離劑（PR）將結(jié)合部分（B）與游離部分（F）分離后，測定結(jié)合部分的放射性強(qiáng)度，并計算相應(yīng)結(jié)合率B/B₀。用已知標(biāo)準(zhǔn)LH含量與對應(yīng)結(jié)合率作圖，即得標(biāo)準(zhǔn)抑制曲線。從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查知對應(yīng)結(jié)合率的待測樣品中LH的含量。

【適用儀器】適用于各類γ-放射免疫分析儀。

【樣本要求】

取靜脈血分離血清，待測；如不當(dāng)天測量，可將樣品密封后，置于2~8℃或-20℃儲存?zhèn)錅y，2~8℃保存不應(yīng)超過1周，-20℃保存不超過2個月。

【用法用量】

1 試劑配制、使用方法和保存

• LH標(biāo)準(zhǔn)品：液體，直接使用。濃度分別為0、5、10、25、50、100、200mIU/ml。2~8℃保存42天內(nèi)穩(wěn)定，未開封標(biāo)準(zhǔn)品2~8℃保存在標(biāo)識的有效期內(nèi)穩(wěn)定。
• ¹²⁵I-LH：凍干品，100管用10ml蒸餾水溶解，50管用5ml蒸餾水溶解，如一次加樣超過100管，兩瓶混合后使用。標(biāo)記物放射性不大于111KBq(3μCi)。2~8℃保存標(biāo)識的有效期內(nèi)穩(wěn)定。
• 兔抗-LH抗體：凍干品，用蒸餾水溶解，溶解方法見封底。同次實驗抗體加樣超過100管時，兩瓶溶解后混合使用。抗體溶解后2~8℃保存可穩(wěn)定42天，凍干品-20℃保存有效期內(nèi)穩(wěn)定。
• 驢抗兔免疫分離劑：液體，直接使用。加樣前充分搖勻！2~8℃保存標(biāo)識的有效期內(nèi)穩(wěn)定。開封后2~8℃保存45天內(nèi)穩(wěn)定。若加樣超過100管，兩瓶混合后搖勻。
• LH質(zhì)控血清：使用方法，保存條件，有效期及附值，詳見質(zhì)控血清使用說明書。

2測定步驟

取圓底聚苯乙烯試管若干，用記號筆或特殊鉛筆編號NSB、S₀-S₅和待測樣品管等，然后用微量加樣器按下表加樣。加樣前所有試劑（尤其分離劑！）包括待測樣品要搖勻，并且平衡到室溫。

操作程序表                              單位：μl

3數(shù)據(jù)處理

• 聯(lián)機(jī)處理: 由電腦自動處理得出結(jié)果。注意放射免疫方法和免疫放射方法由于原理不同，處理軟件也不一樣，用戶一定要使用適合的處理軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。在此建議用戶使用log-logit或四參數(shù)數(shù)據(jù)處理模式。
• 手工作圖或計算器處理:
  •  百分結(jié)合率計算：設(shè)S₀管計數(shù)為B₀，各標(biāo)準(zhǔn)管或樣品管計數(shù)為B，非特異管計數(shù)為NSB，則百分結(jié)合率計算公式為

B/ B₀=(B－NSB)/( B₀－NSB)×

3.2.2 logit計算：各標(biāo)準(zhǔn)點或樣品管的logit值計算公式為

logit=ln[(B/ B₀)/(1－B/ B₀)]

3.2.3 手工作圖：以標(biāo)準(zhǔn)濃度取log值為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的logit值為縱坐標(biāo)在普通坐標(biāo)紙上或以標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的B/B₀為縱坐標(biāo)在log-logit坐標(biāo)紙上畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線（理想化時是一條直線）。根據(jù)待測樣品的B/B₀可以從坐標(biāo)紙上查出樣品的濃度值。注意：如果使用普通坐標(biāo)紙，查出的數(shù)值應(yīng)取反對數(shù)才是zui后的濃度值。

3.2.4計算器處理：使用有線性擬合功能的計算器，可以比較方便地計算出樣品濃度值，具體操作方法請查閱計算器的使用說明書。

3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線舉例（僅供參考，不得用于實際計算）。濃度單位mIU/ml

【參考正常值】

正常人血清參考值：

男性：5~30 mIU/ml

女性：6~217 mIU/ml

濾泡期：2~30 mIU/ml

黃體期：0~20 mIU/ml

排卵高峰：40~200mIU/ml

由于地區(qū)及使用儀器不同，所測的正常值會存在一定的差異，所以本說明書提供的正常值僅作參考。各實驗室能建立符合本實驗室要求的正常值范圍。

【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

• 標(biāo)準(zhǔn)范圍：5~200mIU/ml
• 靈敏度：~1.0mIU/ml
• 精密度：批內(nèi)變異系數(shù)（CV）<10%；批間變異系數(shù)（CV）<15%。
• 使用期限：見產(chǎn)品外包裝。

【禁忌】本品僅供體外診斷用! 
【注意事項】

• 收到藥盒后，盡快存放在2~8℃。
• 使用前請詳細(xì)閱讀此說明書。
• 吸棄上清液時，注意不得損失沉淀物，否則將明顯影響測定結(jié)果。
• 不同試劑盒或不同月份的同種藥盒的組分不得混用。
• 藥盒請在有效期內(nèi)使用。
• 標(biāo)本均應(yīng)視為有潛在傳染性，請按傳染病實驗室規(guī)程操作。
• 使用本藥盒應(yīng)注意放射防護(hù)，放射性廢棄物須按放射防護(hù)條例規(guī)定處理。
• 使用本品的操作人員應(yīng)經(jīng)過專業(yè)技術(shù)培訓(xùn)。

【貯藏】2～8℃保存。

【有效期】1個月。

【執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)】國家食品藥品監(jiān)督管理局《國家藥品標(biāo)準(zhǔn)》，國家藥典委員會  編 2005年5月，WS₁-(R-58)-2004Z。

抗體溶解方法：

兔抗-LH抗體：用蒸餾水溶解， 100管產(chǎn)品每瓶抗體加     ml，50管產(chǎn)品抗體每瓶加       ml（如不填寫，50管藥盒用5ml溶解，100管藥盒用10ml溶解，若為液體抗體請直接使用）。

促黃體生成激素放免試劑盒，LH放免實驗檢測