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Western blotting 蛋白Marker產品簡介!
更新時間:2019-09-05   點擊次數:3219次

Western blotting 蛋白Marker產品簡介!

 

Western Blot Marker是專門為Western Blot試驗設計的分子量標準。傳統的Western Blot試驗需要使用預染蛋白Marker來跟蹤檢測陽性抗原信號和轉膜效率。

但預染蛋白Marker用在Western Blot試驗中有三大缺點:

(1)預染蛋白Marker無法在膠片上曝光,曝光信號需要根據膜上的預染蛋白Marker來判斷,因此后續的圖片需要拼接才能兩者合而為一;

(2)預染蛋白Marker都經過化學修飾,經過化學修飾的蛋白在SDS-PAGE電泳過程中遷移率發生改變,分子量信息不再準確,往往導致Western Blot結果判斷出現較大偏差;

(3)預染蛋白Marker無法檢測作為雜交過程的陽性對照。Western Blot Marker由7種不同分子量的蛋白組成(19、20、35、45、60、65、110 KDa),其中19 、45 、65KDa條帶為藍色預染marker,其它四個條帶都可與人、小鼠、大鼠、山羊、綿羊、兔的IgG恒定區結合。

 

Western Blot Marker可以直接結合二抗,或通過結合一抗間接結合二抗,因此蛋白Marker就能與抗原在同一張膠片上曝出信號,陽性信號可以直接通過Western Blot Marker的位置來判斷。另外,預染發光Western BlotMarker 還可作為Western Blot 試驗的陽性對照。

 

使用說明:
1. 取出后于室溫放置融化;
2. 溫和地充分混勻,取 5μl 該 Western Blot Marker 樣孔中,進行 SDS-PAGE 電泳。
3. 電泳完畢后轉至 PVDF 膜或 NC 膜,與一抗二抗孵育。
4. 孵育完畢,將 Western Blot Marker 與抗原一起通過 ECL 曝光至膠片。

 

Western blotting 蛋白Marker注意事項 :
1. 本產品可直接使用,不需要加熱。
2. 及時更換電泳緩沖液并使用新配制的凝膠,以免影響電泳結果。
3.  該產品與抗血清或高濃度多克隆抗體一起孵育時可能會出現非特異性條帶,此時可降低該預染發光WesternBlot Marker 的上樣量至1~2µl。

 

Western blotting 蛋白Marker產品簡介!

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