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MMP-2&MMP-9明膠酶譜法檢測試劑盒產品介紹

簡介：

基質金屬蛋白酶 (Matrix metalloproteinase ，MMP) 屬于金屬蛋白酶家族，該家族由至少 20 個成員組成，并且已知參與細胞外基質蛋白的代謝。它們以無活性的酶原形式分泌，活化后能夠降解細胞外基質的膠原蛋白，又稱膠原酶。通過影響細胞外基質，膠原酶參與胚胎發育、形態發生、組織重塑等過程，并參與炎癥、腫瘤、心血管、神經等許多疾病過程。血漿與組織中的MMP-2、MMP-9參與各種生理與病理過程，其在臨床診斷和治療中的意義日益受到重視。MMP 可通過酶譜法廣泛檢測。MMP2 & MMP9  Gelatin-Zymography Kit提供了一個簡單的酶譜電泳系統，用于檢測血液、體液、分泌物、細胞裂解液、細胞培養基等樣品中的MMP2,MMP9酶譜及活性。

檢測原理：

本試劑盒采用凝膠反相酶譜法(Zymography)檢測MMP-2、MMP-9 活性及其無活性前體酶原譜系。Zymography 是一種廣為使用的、基于SDS-PAGE 電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測方法，其靈敏度可達1 nM，高于ELISA方法，其基本原理和程序是：制備含有膠原酶底物的SDS-PAGE凝膠，含蛋白酶的樣品在此凝膠中進行電泳，電泳時SDS與樣本中的MMP可逆性結合，導致MMP氫鍵和疏水鍵破壞而不能發揮分解明膠的作用。電泳結束后取出凝膠與酶反應Buffer孵育，MMP恢復活性，凝膠中由于含底物蛋白而被深染，形成深色背景，但在有蛋白酶條帶的位置，蛋白酶將降解凝膠中的底物蛋白，因而不被染色而形成透亮區域，從而能同時指示MMP-2、MMP-9 的大小位置(酶譜)及活性。本試劑盒提供MMP-2、MMP-9 特異蛋白底物及酶學反應緩沖液，可檢測少至0.1~0.5 μl 血液中的MMP-2、MMP-9 酶譜及活性，檢測靈敏度~1nM。試劑盒可進行25-50次標準小膠檢測（如果樣本MMP含量高，孵育時間短，不用換液可最多50次），如果小膠加樣孔為10~15個，則總計可最多檢測500~750個樣品。

檢測目的:

本試劑盒用于檢測組織、細胞中MMP-2、MMP-9 酶譜活性及其前體酶原酶譜。