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脂質體基因轉染試劑(可取代Lipo2000)
更新時間:2024-07-01   點擊次數(shù):446次
脂質體基因轉染試劑(可取代Lipo2000)
 
產品描述
脂質體基因轉染試劑是一種新型的陽離子脂質體轉染試劑,可替代Lipo2000,且與Lipo2000比其毒性更低,轉染效率更高。

本產品適合于將核酸(DNA和RNA)轉染入真核細胞,具有低細胞毒性;對多種類型的細胞和培養(yǎng)板都具有高轉染效率;轉染時血清的存在不影響轉染效率的優(yōu)點。

本產品適用范圍:貼壁細胞和懸浮細胞(哺乳動物細胞系)的轉染。


產品優(yōu)勢
1. 脂質體基因轉染試劑轉染效率高,可替代Lipo2000,重復性好,操作簡單。
2. 無明顯細胞毒性,抗血清干擾,用脂質體基因轉染試劑轉染細胞后,對于大多數(shù)細胞,72小時內不更換培養(yǎng)液無明顯細胞毒性。使用脂質體基因轉染試劑血清的存在不影響轉染效率,這樣可以減少去除血清對細胞的損傷。
3.脂質體基因轉染試劑適用范圍廣,適用于核酸(DNA和RNA)在多種類型細胞和培養(yǎng)器皿上的轉染。

實驗數(shù)據(jù)
為了更明顯看出轉染效率的差異,選擇DNA:轉染試劑相對較少的極限情況,分別用脂質體基因轉染試劑與進口T公司Lipo2000在293(常用的轉染細胞)和786-0(細胞狀態(tài)相對較差)兩種細胞上轉染pLJM1-EGFP質粒,24h或48h后用熒光顯微鏡觀察綠色熒光表達情況,判斷轉染效率。


結論:
1.脂質體基因轉染試劑在這兩種細胞上,表達綠色熒光蛋白的細胞比例均比進口T公司Lipo2000高,說明其轉染效率稍好于進口T公司Lipo2000。
2.轉染后6小時不換液(即不去除轉染試劑)與換液(即去除轉染試劑)相比,表達熒光蛋白細胞的數(shù)量并沒有減少,轉染效率并沒有降低,且不換液時與進口T公司Lipo2000相比,脂質體基因轉染試劑蛋白表達量更高,說明其細胞毒性更低。
3.在細胞狀態(tài)不好和DNA含量較低的極限情況下,脂質體基因轉染試劑仍能使細胞表達一定量的熒光蛋白,說明其抗干擾能力和穩(wěn)定性強。

保存條件

2-4℃保存,有效期一年,避免冷凍。


注意事項
1.質粒DNA轉染的優(yōu)化:為達到最高的轉染效率和降低細胞毒性的影響,可以對DNA和轉染試劑的比例以及細胞密度進行優(yōu)化,一般在1:0.5 ~ 1:5的范圍內優(yōu)化DNA (µg) 和 Lip2000 (µl) 的比例。
2.通常DNA-轉染試劑復合物和細胞一起孵育6小時已經足夠產生較高的轉染效率。大多數(shù)細胞在本產品轉染后長達72小時未見明顯細胞毒性。但轉染后6小時更換新鮮培養(yǎng)基對于一些生長非常迅速的細胞有助于提高轉染效率;對于一些易于轉染的細胞如HEK293T細胞,換液可視細胞生長狀況而定,無需為提高轉染效率而換液。
3.使用高純度的DNA(A260/280比值越接近1.8越好)有助于獲得較高的轉染效率。
4.轉染前細胞需處于良好的生長狀態(tài)。
5.本產品在不同細胞上的轉染效率不同,轉染試劑的添加量需要摸索,具體請參考附表2和附表3。
6.本產品為無菌包裝,無需過濾,請注意無菌取用。
為了您的安全和健康,操作時請穿著實驗服并佩戴一次性手套。
 

 


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