細(xì)胞粘附劑：適用于各種原代細(xì)胞如乳鼠腦神經(jīng)元、易漂浮的傳代細(xì)胞如 PC12 和 HEK293 細(xì)胞，也適用于 藥物處理易漂浮細(xì)胞；其不僅能夠明顯改善細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)、增加細(xì)胞數(shù)量，還可以使細(xì)胞容易耐受 洗滌、換液、藥物處理造成的脫落。對(duì)于生長(zhǎng)在處理過(guò)的瓶皿中的細(xì)胞而言，使用細(xì)胞貼壁粘附劑 可使細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率顯著增加 2-5 倍。 

使用： 

1. 使用時(shí)，將此濃縮溶液以 1:200-1:500 比例稀釋于滅菌純水或生理鹽水（0.9% NaCl）或 PBS 緩沖液中，制備成工作溶液。注意：不同細(xì)胞對(duì)粘附劑的敏感度不同，通常粘附劑處理后的器 皿培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)及生長(zhǎng)狀態(tài)均應(yīng)正常，如果細(xì)胞比較敏感，選用高濃度的細(xì)胞貼壁粘附劑會(huì)使 細(xì)胞過(guò)度粘著，有可能出現(xiàn)細(xì)胞褶皺、偽足伸出不暢或細(xì)胞移動(dòng)分散不佳等現(xiàn)象，此時(shí)應(yīng)將其 進(jìn)行高比例稀釋，避免出現(xiàn)以上情況。 

2. 加入新鮮工作液使其*覆蓋培養(yǎng)瓶皿表面。室溫或 37 oC 孵育 30 min，偶爾搖動(dòng)。 

3. *棄去瓶皿中的液體。可用滅菌蒸餾水或滅菌生理鹽水或 PBS 緩沖液等洗滌瓶皿一次，但 也可不洗滌而盡量甩干后直接鋪種細(xì)胞。經(jīng)過(guò)處理的瓶皿可存放數(shù)天后使用。 

4. 甩干瓶皿即可用于鋪種細(xì)胞，增加多種原代培養(yǎng)細(xì)胞如神經(jīng)元細(xì)胞的貼壁能力。 

可大致分為五類:鈣粘素、選擇素、免疫球蛋白超家族、整合素及透明質(zhì)酸粘素。

一、鈣粘素

鈣粘素(cadherin)屬親同性CAM,其作用依賴于Ca2+。至今已鑒定出30種以上鈣粘素,分布于不同的組織。

鈣粘素分子結(jié)構(gòu)同源性很高,其胞外部分形成5個(gè)結(jié)構(gòu)域,其中4個(gè)同源,均含Ca2+結(jié)合部位。決定鈣粘素結(jié)合特異性的部位在靠N末端的一個(gè)結(jié)構(gòu)域中,只要變更其中2個(gè)氨基酸殘基即可使結(jié)合特異性由E-鈣粘素轉(zhuǎn)變?yōu)镻-鈣粘素。鈣粘素分子的胞質(zhì)部分是最高度保守的區(qū)域,參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。

鈣粘素通過(guò)不同的連接蛋白質(zhì)與不同的細(xì)胞骨架成分相連,如E-鈣粘素通過(guò)α-、β-、γ-連鎖蛋白(catenin)以及粘著斑蛋白(vinculin)、錨蛋白、α輔肌動(dòng)蛋白等與肌動(dòng)蛋白纖維相連;橋粒中的desmoglein及desmocollin則通過(guò)橋粒致密斑與中間纖維相連。

鈣粘素的作用主要有以下幾個(gè)方面:

1.介導(dǎo)細(xì)胞連接,在成年脊椎動(dòng)物,E-鈣粘素是保持上皮細(xì)胞相互粘合的主要CAM,是粘合帶的主要構(gòu)成成分。橋粒中的鈣粘素就是desmoglein 及desmocollin。

2.參與細(xì)胞分化,鈣粘素對(duì)于胚胎細(xì)胞的早期分化及成體組織(尤其是上皮及神經(jīng)組織)的構(gòu)筑有重要作用。在發(fā)育過(guò)程中通過(guò)調(diào)控鈣粘素表達(dá)的種類與數(shù)量可決定胚胎細(xì)胞間的相互作用(粘合、分離、遷移、再粘合),從而通過(guò)細(xì)胞的微環(huán)境,影響細(xì)胞的分化,參與器官形成過(guò)程。抑制細(xì)胞遷移,很多種癌組織中細(xì)胞表面的E鈣粘素減少或消失,以致癌細(xì)胞易從瘤塊脫落,成為侵襲與轉(zhuǎn)移的前提。因而有人將E鈣粘素視為轉(zhuǎn)移抑制分子。

細(xì)胞粘附劑